In vitro antibacterial activity of acetone crude extract, partitioned and chromatographic fractions of Dacryodes edulis leaf

Abstract

The rise in the need for the development of alternative antibiotics is a very crucial and urgent matter. This is as a result of abuse of antibiotics use which resulted in the emergence of multi-drug resistance microorganisms.The objective of this study is to determine the antimicrobial activities of the leaf extract of African pear Dacryodes edulis on bacterial isolates.The leaf of D. edulis was extracted with absolute acetone, partitioned into Dichloromethane and water, and fractionized with thin-layer chromatography. The antibacterial activities of the crude extract, partitioned and chromatographic fractions were determined by agar well diffusion test, while the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) of the extracts and fractions were determined by broth dilution and agar diffusion methods respectively. Partitioning resulted in two major fractions; aqueous (AQUpf) and dichloromethane (DCMcf), and chromatography produced three column fractions by column chromatography; AQU1cf, AQU2cf and DCMcf. Both crude extract and fractions had antibacterial activities against all tested bacteria while the control standard antibiotic (ampicillin) was not active against two bacteria, Pseudomonas aeruginosa and Bacillus subtilis. The results showed that crude extract and fractions exhibited broadspectrum antibacterial efficacy but DCMpf and AQUpf fractions had greater activities. There was a significant difference between the activities of DCMpf (19-32mm) and AQUpf (17-30mm) at 95% confidence interval (p<0.05), which indicated that DCM is a better solvent for extraction than water. Both AQU1cf and DCMcf had significantly greater zones of inhibitions and therefore greater activity compared to AQU2cf (p<0.05). All the fractions showed greater antimicrobial efficacy than the crude extract hence proving that the fractions contain substantial bioactives. The MIC index of all extracts and fractions indicates the bactericidal activity of the plant. From this study, D. edulis leaf appears to be a promising source of antimicrobial agents as it retained bioactive in a partially purified state.

L’augmentation du besoin de développement d’antibiotiques alternatifs est une question très cruciale et urgente. Ceci est dû à l’utilisation abusive d'antibiotiques qui a entraîné l'émergence de micro-organismes multirésistants aux médicaments. L'objectif de cette étude est de déterminer les activités antimicrobiennes de l'extrait de feuille de poirier africain Dacryodes edulis sur des isolats bactériens.La feuille de Dacryodes edulis a été extraite avec de l’acétone absolue, partagée dans du dichlorométhane et de l'eau, et fractionnée par chromatographie en couche mince. Les activités antibactériennes de l’extrait brut, des fractions partitionnées et chromatographiques ont été déterminées par un test de diffusion en puits d’agar, tandis que la concentration minimale inhibitrice (CMI) et la concentration bactéricide minimale (CBM) des extraits et des fractions ont été déterminées respectivement par les méthodes de dilution en bouillon et de diffusion sur gélose. Le partitionnement a abouti à deux fractions principales ; aqueux (AQUpf) et du dichlorométhane (DCMcf), et la chromatographie a produit trois fractions de colonne par chromatographie sur colonne ; AQU1cf, AQU2cf et DCMcf. L'extrait brut et les fractions avaient des activités antibactériennes contre toutes les bactéries testées, tandis que l’antibiotique standard de contrôle (ampicilline) n'était pas actif contre deux bactéries, Pseudomonas aeruginosa et Bacillus subtilis. Les résultats ont montré que l'extrait brut et les fractions présentaient une efficacité antibactérienne à large spectre, mais que les fractions DCMpf et AQUpf avaient des activités plus importantes. Il y avait une différence significative entre les activités du DCMpf (19-32 mm) et de l’AQUpf (17-30 mm) à un intervalle de confiance de 95 % (p < 0,05), ce qui indique que le DCM est un meilleur solvant d'extraction que l’eau. AQU1cf et DCMcf avaient des zones d'inhibition significativement plus grandes et donc une plus grande activité par rapport à AQU2cf (p<0,05). Toutes les fractions ont montré une plus grande efficacité antimicrobienne que l'extrait brut, prouvant ainsi que les fractions contiennent des substances bioactives substantielles. L'indice MIC de tous les extraits et fractions indique l'activité bactéricide de la plante. D’après cette étude, la feuille de D. edulis semble être une source prometteuse d’agents antimicrobiens car elle conserve son bioactivité dans un état partiellement purifié.